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标记定量蛋白组
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技术简介
标记定量蛋白质组学技术(iTRAQ和TMT)是目前被广泛应用的两种标记定量蛋白质组技术。
其原理分别是通过与氨基酸末端氨基以及赖氨酸残基的游离氨基结合,实现对多肽的标记,并用不同分子量的试剂对不同来源样品进行标记,从而实现不同样品间蛋白质组比较的目标。
具体而言,不同标记试剂与来源于不同样品胰酶消化后的肽段结合,经过色谱分离,并通过一级质谱和二级质谱。平衡基团在二级质谱时发生中性丢失,而报告基团在二级质谱低质量区域产生多个报告离子,其信号强度分别代表该标记样品的表达量,根据报告离子的峰面积计算同一蛋白质同一肽段在不同样品间的比值,从而实现蛋白的定量。
技术流程
1.蛋白样品制备,定量,酶解,标记;
2.反相色谱分离,强阳离子交换色谱分离;
3.LC-MSMS串联质谱定量与定性,数据库检索;
4.相关生物信息学分析;
5.实验报告提交。
专业品质
采用Triple-TOF 5600+和Q-Exactive液质联用系统,使得鉴定到的蛋白数量尽量更多、结果更为可靠。
同时提供专业的生物信息学分析(包括:GO功能分类、KEGG通路、互作网络分析等)服务,实验结果通俗易懂,论文发表一气呵成!
